Análise molecular da Endometrite Crônica

O melhor exemplo de patologia causada por uma microbiota endometrial alterada é a Endometrite Crônica (EC). EC é uma inflamação persistente do tecido endometrial causada por uma infecção da cavidade uterina provocada por patógenos bacterianos. Por ser, geralmente, assintomática e os métodos atuais de diagnóstico clássico (histologia, histeroscopia e cultura microbiana) serem insatisfatórios, a EC é pouco investigada, apesar de afetar aproximadamente 30% das mulheres inférteis, enquanto a prevalência em pacientes com Repetidas Falhas de Implantação (RIF) e Perda Gestacional Recorrente (RPL) pode chegar a 66%. O teste ALICE identifica as bactérias mais frequentes associadas à Endometrite Crônica.

Indicações para o teste ALICE

Todas as pacientes com desejo reprodutivo podem ser beneficiadas de uma análise do ambiente microbiótico que o embrião encontrará no momento da implantação. O teste ALICE é especialmente indicado para pacientes com histórico de RIF (falhas de implantação) e RPL (aborto de repetição), já que a Endometrite Crônica pode estar associada a estas complicações.

Metodologia

O teste ALICE utiliza a mais avançada tecnologia de Sequenciamento de Nova Geração (NGS) para fornecer informações sobre a microbiota do endométrio, analisando a abundância de bactérias relacionadas com a Endometrite Crônica. A tecnologia tem como base a extração de DNA bacteriano seguida de amplificação e sequenciamento do gene 16S rRNA das bactérias que causam a endometrite crônica com maior frequência. O teste ALICE pode avaliar os genes bacterianos presentes na amostra. O gene 16S, presente em todas as bactérias, apresenta 9 regiões variáveis com sequências de DNA específicas para cada espécie. Isto permite a identificação e quantificação relativa das bactérias causadoras da Endometrite Crônica.

Laudo e interpretação de resultados

Se o resultado do teste ALICE é positivo, o laudo mostrará os patógenos detectados e a porcentagem das bactérias ligadas à Endometrite Crônica. Estas bactérias são: Enterococcus spp., Enterobacteriaceae (Escherichia e Klebsiella), Streptococcus spp., Staphylococcus spp., Mycoplasma spp, e Ureaplasma spp. Além disso, informará sobre a existência de outras bactérias patógenas associadas a doenças sexualmente transmissíveis (DST), como Chlamydia e Neisseria. Dependendo do resultado do teste, será incluída uma recomendação de tratamento com os antibióticos e probióticos adequados a cada paciente.

Benefícios de detectar patógenos da EC por NGS vs métodos tradicionais

O diagnóstico atual da Endometrite Crônica é tradicionalmente baseado em histologia, histeroscopia e/ou cultura microbiana. No entanto, esses três métodos clássicos apresentam resultados inconclusivos ou falsos em 80% dos casos. Enquanto a histologia geralmente infradiagnostica a Endometrite Crônica, a histeroscopia geralmente superdiagnostica a doença. Ambos métodos não são capazes de identificar o patógeno causante, razão pela qual o tratamento não é específico. O cultivo microbiano é capaz de isolar o patógeno causante, no entanto entre 20% e 60% das bactérias, dependendo da sua localização, não podem ser cultivadas ou não se avaliam de forma habitual no âmbito clínico. A microbiologia molecular obtém resultados equivalentes aos obtidos através da combinação dos 3 métodos: histologia, histeroscopia e cultura microbiana. 

Referências
Moreno I, Cicinelli E, Garcia-Grau I, Gonzalez M, Bau D, Vilella F, De Ziegler D, Resta L, Valbuena D, Simon C. The diagnosis of chronic endometritis in infertile asymptomatic women: a comparative study of histology, microbial cultures, hysteroscopy, and molecular microbiology. Am J Obstet Gynecol. 2018; 218(6):602.e1-602.e16
Cicinelli E, Matteo M, Tinelli R, Pinto V, Marinaccio M, Indraccolo U, De Ziegler D, Resta L. Chronic endometritis due to common bacteria is prevalent in women with recurrent miscarriage as confirmed by improved pregnancy outcome after antibiotic treatment. Reprod Sci 2014; 21(5):640-7.
Cicinelli E, Matteo M, Tinelli R, Lepera A, Alfonso R, Indraccolo U, Marocchella S, Greco P, Resta L. Prevalence of chronic endometritis in repeated unexplained implantation failure and the IVF success rate after antibiotic therapy. Hum Reprod, 2015; 30(2):323-30.
Moreno I, Codoñer F M, Vilella F, Valbuena D, Martinez-Blanch J F, Jimenez-Almazán J, Alonso R, Alamá P, Remohí J, Pellicer A, Ramon D, Simon C. Evidence that the endometrial microbiota has an effect on implantation success or failure. Am J Obstet Gynecol. 2016.

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